研究人员开发了跟踪黄热病病毒复制的技术
普林斯顿大学分子生物学系的研究人员开发出一种新方法,可以精确跟踪黄热病病毒在个体宿主免疫细胞中的复制。这项技术在3月14日发表在Nature Communications期刊上的论文中有所描述,可以帮助开发针对一系列病毒的新疫苗,包括登革热和寨卡病毒。
黄热病病毒(YFV)是黄病毒科的一员,也包括登革热和寨卡病毒。尽管广泛使用高效疫苗,但该病毒被认为可以感染体内多种细胞,每年导致多达20万例黄热病。该疫苗由一种名为YFV-17D的活的减毒形式的病毒组成,其RNA基因组与毒力株的同源性超过99%。减毒病毒基因组中1%的差异可能会微妙地改变与宿主免疫系统的相互作用,从而诱导保护性免疫反应而不会引起疾病。
探索病毒如何与宿主相互作用,以及这些过程如何导致毒力和疾病,Alexander Ploss,分子生物学助理教授和普林斯顿大学的同事采用了一种称为RNA Prime流的技术,可以检测单个细胞内的RNA分子。他们使用该技术追踪在感染小鼠血液中循环的各种免疫细胞中复制的病毒颗粒的存在。小鼠通常对YFV有抗性,但Ploss及其同事发现,如果从小鼠免疫细胞中除去转录因子STAT1(抗病毒干扰素信号通路的一部分),即使是减毒的YFV-17D菌株也是致命的。该发现表明免疫细胞内的干扰素信号传导保护小鼠免受YFV的影响,并且该途径中的物种特异性差异允许病毒在人和某些其他灵长类动物中复制,但不能在小鼠中复制。
因此,YFV-17D能够在免疫系统被能够激活干扰素信号传导的人免疫细胞替代的小鼠中有效复制。然而,就像用减毒YFV疫苗免疫的人类一样,这些“人源化”小鼠在感染YFV-17D时没有出现疾病症状,这让Ploss及其同事研究了减毒病毒与人体免疫系统相互作用。利用他们的病毒RNA流技术,研究人员确定该病毒可以在某些人类免疫细胞类型中复制,包括B淋巴细胞和自然杀伤细胞,其中之前未检测到病毒。研究人员发现,病毒靶向的人类细胞类型在动物的血液和脾脏感染过程中发生变化,突出了人体免疫系统中YFV-17D复制的独特动态。
下一步,分子生物学博士后研究员兼该研究的第一作者弗洛里安·杜阿姆(Florian Douam)表示,在YFV感染患者和YFV-17D疫苗接种者的免疫细胞亚群中确认YFV复制。 。Douam说,病毒RNA流现在提供了进行此类分析的手段。
研究人员还计划研究黄热病毒的毒力和减毒株是否感染不同的宿主免疫细胞。这种方法可能有助于解释为什么有些感染病毒的人死亡而其他人只产生最轻微的症状,以及YFV-17D基因组中的哪些变化会削弱病毒导致疾病的能力。“这可以指导合理设计针对相关病原体的疫苗,如寨卡病毒和登革热病毒,”普洛斯说。
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