达普霉素孔的形成和化学计量取决于靶膜的膜电位
Daptomycin是一种钙依赖性脂多肽抗生素,临床上用于治疗革兰氏阳性病原体引起的严重感染。它的具体行动方式多少有些争议;最大的问题是daptomycin孔隙的形成,我们在这里直接研究。我们首先进行了筛选实验使用propidium碘(PI)进入枯草芽孢杆菌细胞和选择最优和治疗相关条件(10µg /毫升daptomycin和1.25毫米氯化钙)的后续分析。
通过对平面脂质双层的电导测量,我们发现daptomycin形成了非均匀的低聚孔隙,电导范围从120ps到14ns。最小的电导单位可能是二聚体;然而,四聚物和五聚物最常出现在膜中。此外,daptomycin成孔活性与膜电压呈指数关系。我们进一步利用荧光法分析枯草芽孢杆菌细胞的膜透性活性[PI和DiSC3(5)]。Daptomycin对具有高初始膜电位的细胞具有最快速的通透性,并在几分钟内消散。低初始膜电位阻碍daptomycin孔隙形成。
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