一种分离技术 可分离出具有高纯度和活力的细胞
荧光激活细胞分选(FACS)是一种现代细胞分析技术,用于定量检测细胞的生理,生化,免疫和分子生物学特征-它可以进一步从复杂的生物样品中分离出特定的细胞群子集。尽管当前的商用FACS具有相当准确的细胞分选能力,但它仍然存在一些固有的局限性。首先,当前的商业FACS体积庞大且极其昂贵,通常只能由共享的用户设施提供。其次,当前的分选机制要求通过小喷嘴生成细胞内含的气溶胶,这会引起较大的剪切应力,从而损坏细胞。因此,迫切需要开发一种简单且生物相容的方法来不仅以高纯度分选生物细胞,
在这项研究中,由Ye Ai副教授领导的新加坡科技大学(SUTD)研究团队与新加坡国家心脏中心(NHCS)的Chrishan Ramachandra助理教授合作开发了无鞘声学荧光激活细胞分选技术( aFACS)系统用于单细胞水平的荧光检测和分离。微流体分选设备使用弹性惯性粒子聚焦技术在单个文件中对齐细胞,以提高分选精度和效率,而无需稀释样品。开发的分选设备可以有效地聚焦1μm的颗粒,这代表了大多数细胞分选应用的一般最小尺寸。在单细胞水平上进行荧光询问后,单个细胞通过50μm宽的高度聚焦声场偏转到目标出口。在已开发的aFACS中使用柔和的声力提供了一种生物相容性更高的分选解决方案,以帮助研究人员分离目标细胞,同时保持较高的细胞活力。
临床首席研究员Chrishan博士说:“源自诱导性多能干细胞的人类心肌细胞(CM)(iPSC)在了解各种心脏疾病的机制方面显示出巨大潜力。由于这些iPSC-CM是在个体基础上生成的,因此它们构成了该特定个体的基因组成,并带有任何易患心脏病的倾向。因此,这些iPSC-CM可以用于在培养皿中对固有的心脏病进行建模,并且还可以用作药物筛选平台,以识别新颖的,针对患者的疗法。然而,纯化这些iPSC-CM的能力是该领域的主要限制。用于纯化的现有技术导致大量细胞死亡。拥有可以纯化iPSC-CM并保持其生存能力的技术,对心脏研究领域非常有利。”
技术主要研究人员Ai博士说:“与商用FACS系统相比,我们的aFACS在分选iPSC-CM等易碎生物细胞方面显示出出色的生物相容性。此外,无鞘声学分选设备能够防止样品稀释和交叉污染。一个单一的入口而不会产生气溶胶,它能够实现90%以上的分选纯度和回收率,并且只会在3-4%的范围内导致细胞活力的很小的下降。商业FACS分选后的生存力下降了35-45%。”
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