测量细胞存活率的新方法
麻省理工学院的生物工程师表示他们已经设计了一种新的毒性测试,可以测量化学物质对细胞存活的影响,其灵敏度和速度远远高于目前使用的一些最流行的测试。用于测量细胞存活的传统测试,称为集落形成测定,涉及在将细胞暴露于化学化合物或另一种有害物质如辐射后,在组织培养皿中培养细胞集落两到三周。然后,研究人员计算菌落数,以确定处理如何影响细胞的存活。
该研究的高级作者Bevin Engelward解释说:“计数非常费力,而且非常困难,因为你不得不经常判断殖民地和碎片是什么。” “很少有人使用菌落形成试验,因为它很难,太慢,并且需要大量的细胞生长培养基,所以你需要大量的化合物进行测试。”
近年来,科学家们开始使用其他方法,这些方法比集落形成试验更快但不那么准确和敏感。这些测试不直接测量细胞生长,而是分析线粒体功能。
Engelward及其同事开始开展一项测试,该测试可在短短几天内产生结果,同时仍能与集落形成测定的准确性和灵敏度相匹配。他们发明的系统,他们称之为MicroColonyChip,由板上的小孔组成。将经处理和未经处理的细胞置于这些孔中并开始以网格图案形成非常小的菌落。在短短的几天内,在肉眼可见菌落之前,研究人员可以使用显微镜对细胞的DNA进行成像,这些DNA被荧光标记。
研究人员还创建了一个软件程序,测量每个孔中的荧光DNA量,然后计算细胞生长的程度。通过比较处理和未处理细胞的生长,研究人员可以确定他们正在研究的任何化合物的毒性。“我们有一个自动扫描系统来进行荧光成像,之后,图像分析完全自动化,”前麻省理工学院研究生和博士后Le Ngo报道,该报的主要作者。
研究人员将他们的新测试与金标准集落形成测定进行了比较,发现结果难以区分。他们还能够精确地再现20年前使用集落形成测定法收集的γ辐射对人淋巴母细胞样细胞影响的数据。使用MicroColonyChip,研究人员在三天内获得了他们的数据,而不是三周。
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