看着癌细胞接管
从历史上看,量化DNA一直是了解细胞功能的有用工具,并量化细胞在细胞周期的哪个阶段。计算存在的DNA的量通常通过将荧光团(在光激发下可以重新发光的荧光化学化合物)以特定的比例与细胞的DNA结合,并通过流式细胞术以高通量方式测量变化来进行(计算从大量细胞中改变DNA物质)。
虽然该方法允许研究细胞群的某些方面,但细胞群的动态变化(以及不同细胞群中的变量)不允许在个体水平上检查细胞。此外,将细微且不稳定的细胞群暴露于影响行为的毒素将导致对真实细胞内容和行为的不准确理解。
以前,通过结合高度特异性激光扫描细胞计数和荧光标记进行可视化研究。所使用的许多荧光团与活细胞(例如DAPI)不相容,因为它们不是膜可渗透的化学物质,并迫使研究人员通过化学方法固定细胞(因此在时间上冻结)。细胞可以贴上标签。膜透性荧光团最近被设计用于可视化活染色体随时间的移动,但很快就发现一些最常见的染料含有细胞毒素,这些细胞毒素引发DNA突变并触发某些基因(如p53)被激活。另外,实验所需的UV光暴露最终会导致DNA分裂,导致细胞周期停滞和细胞凋亡。
显然,当试剂影响实验结果时,不能使用前面提到的研究细胞行为(特别是不稳定癌细胞的行为)的方法,因此需要新的方法。
亚利桑那大学癌症中心的Gomes等人最近在细胞分部发表了一篇方法论文,他们试图通过使用无毒程序在一段时间内测量活细胞中的DNA含量来弥合细胞可视化和未改变的细胞环境之间的差距。时间他们使用荧光团Hoechst 33342,一种活细胞DNA染料,可以透过细胞膜,结合DNA链的AT区域,并且在稳定的环境中与活细胞相容(它不应该诱导细胞毒性作用,干扰细胞膜)研究细胞)。该方法还允许使用非3D成像,使科学家能够更轻松,更快速地完成整个过程。
成像方法的这一突破为科学家提供了观察癌细胞生长和变异的工具,其方式以前既麻烦又难以确认。它是探索多倍体细胞未解决的细胞分裂和增殖动力学的一种有吸引力的新技术,无需昂贵和复杂的3D成像,并且根据作者可以与任何化学计量的活细胞DNA染料一起使用。除癌症研究外,这种成像方式为不同学科的研究人员提供了更好的学习和了解细胞行为和过程的能力。
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