开发了新的显微镜技术来分析细胞粘着斑动力学
粘着斑是一种大的特化蛋白质,位于细胞膜与细胞外基质(ECM)相遇的区域,细胞外基质是细胞周围的分子集合,为细胞提供支持和调节微机械信号。检查粘着斑是了解细胞如何增殖,分化和迁移的关键因素之一 - 这有助于治疗癌症等疾病。
贝克曼高级科学与技术研究所和伊利诺伊大学微纳米技术实验室的研究人员开发了一种新型的显微镜,可以观察细胞膜粘着斑的形成和演变。他们的论文“使用光子谐振器外耦合显微镜(PROM)定量分析焦点粘附动力学”详述了新的活细胞成像技术如何观察细胞膜粘着斑的形成和演变。它最近发表在Light:Science&Applications上。
“这是一种新型的生物物理方法,用于测量光子晶体表面生物材料反射光谱的峰强度偏移(PIS),”贝克曼研究所博士后研究员和论文的第一作者岳卓说。“PIS显示细胞粘着区域中簇大小的变化,同时它还活着。”
以前的方法涉及用荧光染料或标签标记细胞,这不仅可以改变细胞的物理和化学组成,而且对于研究人员来说也是麻烦的。“通常人们会看到荧光标签或蛋白质的粘着斑,”卓说。“但荧光成像是一种侵入性成像方法,可能会改变构象或阻断粘着区域中蛋白质的结合位点。”
荧光显微镜受到称为“光漂白”的效应的严重限制,其中荧光团仅保持其亮度几秒钟。然而,许多重要的细胞过程在数分钟,数小时或数天内发生。因为PROM不使用荧光团,并且仅使用低强度照明,所以对活细胞的测量时间没有限制。
“未来,我们计划使用PROM研究干细胞分化,这可能会在几周内发生,”卓说。
PROM利用光子晶体生物传感器表面产生消逝场(表面结合的电磁场),其仅选择性地仅照射ECM附着的细胞膜和直接在细胞膜内的相关蛋白质聚集体。的光子晶体严格限制光的横向传播,同时保持光紧密结合到生物传感器表面上,以使细胞膜附着足迹高分辨率成像。
“PROM提供有关细胞膜特异性发生的动态过程的实时信息,这是任何其他方法无法获得的,”电气和计算机工程和生物工程教授,PROM项目的主要研究员Brian Cunningham说。“由于许多生物过程是通过将细胞附着到表面来介导的,因此PROM提供了迁移,趋化性,化学毒性,分化,生物膜形成和分裂的独特视图。我们认为PROM是细胞生物学家的一种令人兴奋的新工具,也可以是应用于个性化抗癌药物选择,组织工程和传感器整合的肿瘤建模。“
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