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CRISPR-Cas9系统的变异提供了编辑而不会削减两条DNA链

来自日本多家机构的研究人员开发了一种新方法来编辑基因,这种方法只涉及切割一条DNA而不是两条DNA,正如CRISPR-Cas9的正常情况一样。在他们发表在“ 科学 ”杂志上的论文中,该团队描述了该技术以及为什么他们认为这对某些应用更好。

CRISPR-Cas9系统的变异提供了编辑而不会削减两条DNA链

CRISPR-Cas9 基因编辑技术在过去几年中成为头条新闻,因为它允许相对容易的DNA替换。它涉及将细菌与模板一起引入细胞中 - 细菌在特定位置切割DNA链,然后细胞使用模板进行修复 - 结果是已经编辑以适应特定需要的螺旋。但有时出现问题,因为其他细胞机制也会参与,这可能导致不必要的删除或插入。为了解决这个问题,至少在一部分,研究人员已经用脱氨酶从一个(即能够从化合物中除去氨基的酶)组合Cas9 海七鳃鳗,允许单链编辑。

研究人员采用了两种途径来实现相同的目标,一种使用核酸酶死亡版本的Cas9,这使得它根本无法切割链,另一种使用能够创造他们所描述的切口剪切的切口酶Cas9一条链。在两种方法中,得到的Cas9与活化诱导的胞苷脱氨酶融合,这允许仅切割一条链然后进行其取代工作 - 所有这些都不需要模板。经过大量测试后,该团队得出结论,使用切口酶Cas9方法更有效。他们还报告说,他们也能够同时对两个基因进行更改,并且通过添加另一种酶,他们能够提高该技术的效率。

该团队在酵母样本上测试了该技术(因为它没有自己的内部基因改变系统),并发现它导致的附带突变比常规CRISPR-Cas9少。他们认为该技术可能对基因编辑研究有用,因为其他细菌和细胞类型特别容易发生突变。

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