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ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２・２３０２．２００９．０４．０２０・综述・

幽门螺杆菌的临床诊断进展

周治中王丽梅木

幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｅｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ）为上消化道

疾病的重要致病因子，与胃窦炎、胃溃疡、胃腺癌

及胃黏膜相关Ｂ细胞淋巴瘤的发生均有密切的关

系。及早进行Ｈｐ诊断，明确是否伴有Ｕｐ感染，

对防治上消化道疾病有重要意义。目前，临床检测

Ｈｐ的方法有多种，主要分为侵入性和非侵人性两

大类，各有其优缺点，适用于不同的临床情况。现

对上述方法及研究进展综述如下。

一、侵人陛诊断

需借助胃镜取胃黏膜活检标本，再行Ｈｐ病原

学或相关指标检测。标本采取的部位也影响检测结

果的准确。

１．细菌培养

从患者的胃黏膜组织中成功分离培养出Ｈｐ，

是诊断Ｈｐ的“金标准”，并可进行后续的细菌药

敏和耐药性实验，对不同菌株做遗传学研究。

Ｈｐ的生长条件非常苛刻，合适的培养基及培

养条件对于成功培养Ｈｐ至关重要。需要注意的是

培养时间延长，培养基水份、营养成分损失，空气

中放置时间过长、气体温度条件不适、抗生素作用

等因素均易使培养中的Ｈｐ发生变异，菌体从弯曲

杆菌变为球型、丝状型而呈非可培养或难于再培养

的状态¨Ｊ。

Ｈｐ培养的成功还与样品的正确采集和样品采

集后的及时处理有直接关系。近期未使用抗Ｈｐ药

物患者可于胃窦部取样，而使用抗Ｈｐ药物患者同

时于胃底、胃体黏膜溃疡、隆起糜烂性病灶部位采

样［２】。可在胃镜下喷洒尿素．酚红混合液后以素

基金项目：国家自然科学基金资助项目（项目编号：

３０８０１０５５、

作者单位：７１００３２西安，第四军医大学基础部微生物

学教研室。・通讯作者

万方数据

胃镜检查，通过观察胃黏膜变情况，了解Ｈｐ感

染的分布范围、密度、类型（弥漫性或斑片性），

避免盲目活检。但是，在菌量少、尿素酶活性不强

等情况下，酚红显不显著可影响观察旧Ｊ。样本

采集后，应立即进行细菌培养或隔绝空气湿润低温

保存于介质中，并于３ｈ内接种。

由于Ｈｐ的细菌培养是Ｈｐ诊断试验中技术要

求最高的一种方法，有时有假阴性出现，因此不适

于在基层医院推广。

２．组织切片染

组织切片染可直接观察Ｈｐ，有极高的特异

性和敏感性，同时可明确胃部病变性质。其方法很

多，最常用的有改良Ｇｉｅｍｓａ染、Ｗａｒｔｈｉｎ—Ｓｔａｒｙ

银染及甲苯胺蓝染。相比较而言，Ｗａｒｔｈｉｎ・

Ｓｔａｒｙ银染在组织切片染中效果最好，但操作

繁琐、花费昂贵、技术要求熟练程度高，难以在一

般条件医院普及。甲苯胺蓝染操作简便、省时，

对Ｈｐ有较强亲和力，可采用稍过染、深分化的退

行性染法，加大Ｈｐ与背景的差，使之更易与

组织碎片、污染菌及其它杂菌相区别，值得在临床

病检中推广应用幢ｊ。

３．聚合酶链反应（ＰｅＲ）检测

ＰＣＲ具有快速、敏感、特异的优点，对胃黏

膜标本的要求较低，适用于标本中Ｈｐ含量过少或

因含大量正常菌而降低Ｈｐ培养敏感性时Ｈｐ的

检测，还可用于对Ｈｐ进行分型鉴定。常用的引物

主要有来源于尿素酶基因（ｕｒｅＡ）、１６ｓｒＲＮＡ基

因、２３ｓｒＲＮＡ基因、磷酸葡萄糖氨基转移酶基因

（ｕｒｅＣ）、细胞毒素相关基因（ｖａｅＡ、ｃａｇＡ）等，

其中前两种基因的检测应用最为广泛【３’４Ｊ。

ＰＣＲ检测在操作过程中极易受到污染，因此

对于胃镜、活检通道、活检钳的洗涤、消毒以及实

验操作的要求都十分严格。目前，实时荧光ＰＣＲ

热堂痘皇壹生虫堂２Ｑ塑生箜２鲞筮生翅』鲤堡型丛！塑巳ｉ趔堕翌墅塑垫鱼№！ｉ！！！！赶至Ｑ塑：ｙ旦！Ｚ：丛Ｑ堡‘２４１・

能够有效控制ＰＣＲ产物的实验室污染，更适合于

实验室常规检测。由于根除治疗后残存胃中的Ｈｐ

ＤＮＡ亦可能被ＰＣＲ扩增而出现假阳性，因此，

ＰＣＲ不宜用来判断Ｈｐ治疗的短期疗效。

４．尿素酶试验（ＲＵＴ）

ＲＵＴ是基于Ｈｐ可产生极强的尿素酶活性，而

建立的一套能够较好的检测Ｈｐ感染的方法，但该

法仍是一种需通过胃镜取活检的侵入性方法。尿素

酶分解尿素产生ＮＨ，和ＣＯ：，ＮＨ，的产生可使ｐＨ

值升高，胃黏膜组织呈碱性，据此原理可通过加入

ｐＨ指示剂通过颜的改变判断有无Ｈｐ感染存在，

即尿素酶试验法【５Ｊ。

目前已有多种尿素酶试剂盒或试纸可供临床使

用，因其操作简便、费用低、省时，在临床中得到

广泛使用，尤其适于基层医疗单位使用。但由于试

剂盒或试纸商品种类繁多，质量或观察时间不同，

检测结果差异较大。同时，检测结果受标本内细菌

密度、“灶性分布”的影响，有一定假阴性率。此

外，萎缩性胃炎患者由于胃酸缺乏，其他产尿素酶

的细菌亦可在胃内生长，导致ＲＵＴ假阳性。如采

取多点活检或结合细菌培养可望提高诊断的准确

性。

二、非侵入性诊断（需取胃液、血清、唾液、

粪便等标本）

１．尿素呼气试验（ＵＢＴ）

ＵＢＴ是目前应用最广泛的检测Ｈｐ的常规方

法，敏感性和特异性很高，均≥９５％，可定性定量

测定胃内Ｈｐ感染的总体情况，避免因活检标本

Ｈｐ分布不均可能造成的假阴性结果，是目前被认

为除细菌培养之外诊断Ｈｐ感染的“金标准”。其

原理是Ｈｐ在体内产生尿素酶，用１３ｃ或１４Ｃ同位素

标记尿素口服后可被Ｈｐ产生的尿素酶分解，产

生¨ＣＯ：或ＨＣＯ：，通过从受检者呼出气体中检测出

的１３Ｃ丰度或１４ｃ活性来判断受检者胃内Ｈｐ的感染

程度。此项检测，临床应用广泛，不需做内镜取标

本，技术要求低，缺点是费用高。”ｃ和１４ｃ呼气试

验各有其优缺点及不同的临床应用范围№・７１，具体

差异见表１。

万方数据

表１１３Ｃ－ＵＢＴ和“Ｃ．ＵＢＴ的差异

３Ｃ．ＵＢＴ¨Ｃ．ＵＢＴ

放射性无

安全性好翥销ｉ粼于孕有

测定方法气体同位素质谱仪闪烁扫描仪

费用较贵，难以推广较便宜，容易推广

２．１５Ｎ一尿氨排出试验

Ｈｐ尿素酶分解尿素生成ＣＯ：和ＮＨ，，后者经

吸收在肝脏代谢，从肾以氮、铵及尿素的形式排

出，因此口服含”Ｎ的尿素后，测定一定时间内尿

中１５Ｎ排出量，可判断有无Ｈｐ感染Ｍ

Ｊ。该方法的

原理等同ＵＢＴ，无放射性、无创，敏感性和特异

性高。但需质联用仪器，并且操作繁琐，检测结

果受机体代谢、吸收、排泄等众多因素干扰。其临

床诊断价值还有待研究。

３．胃液分析

胃液分析是检测Ｈｐ的一种简单、经济和有效

的方法，同时可以提供相关临床病理信息，辅助诊

断胃癌相关主要危险因子（如萎缩性胃炎）坤Ｊ。对

于内镜检查结果良好的患者，医师往往忽略其相关

的后续检查（ＲｕＴ和活检），造成许多Ｈｐ感染者

以及泌酸黏膜相关性萎缩性胃炎（ＡＧＯＭ）患者的

漏诊。研究表明，胃液ｐＨ的改变和胃液中铵盐浓

聚物的含量与胃内Ｈｐ感染密切相关。Ｈｐ感染和

ＡＧＯＭ均可造成这两种参数的改变。因此，在内镜

检查过程中，若能对胃液ｐＨ和铵盐浓聚物的含量

测定，则可对Ｈｐ感染和ＡＧＯＭ进行较为准确的预

测，再选择性地进行后续检查，能够有效防止Ｈｐ

感染者和ＡＧＯＭ患者的漏诊。目前，已有一种新

装置能够连接到任何内镜检查设备上，在内镜检查

过程中，抽取胃液实时自动检测其中铵盐浓聚物含

量和ｐＨ，２ｒａｉｎ内即可完成胃液样本的分析，临床

诊断的可靠性已获证实，Ｈｐ检出率达到９８％。

４．Ｈｐ相关抗原、抗体的检测

（１）血清学检测：血清学检测是一种极具潜力

的检测手段，主要有ＥＬＩＳＡ、胶凝集试验、

Ｗｅｓｔｅｒｎ

ｂｌｏｔｔｉｎｇ以及斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＦ－

ＧＡ）。选择合适的抗原物质可以提高血清学检测的

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准确性。张虹雨等【９１对感染Ｈｐ人检测血清中

ＣａｇＡ、ＶａｃＡ、Ｕｒｅ、Ｈｓｐ６０、ＲｄｘＡ五种ＩｇＧ抗体后

得出结论：Ｕｒｅ免疫原性强，表达充分，其抗体可

作为Ｈｐ感染阳性的标志物；ｃ舭基因在Ｈｐ中呈

不完全分布，ＶａｃＡ蛋白在Ｈｐ中不完全表达，限

制了这两种抗体单独作为Ｈｐ感染阳性的标志物；

ｎｓｐ６０抗体水平对于Ｈｐ感染的检测价值不大；

ＲｄｘＡ抗体水平不能标志甲硝唑耐药的水平。同时，

在Ｈｐ感染初期抗体效价尚未上升时，血清学检测

可呈假阴性；在Ｈｐ根除后血液中ＩｇＧ抗体水平可

维持半年，在临床诊断过程中不能判断是否是既往

感染。因此血清Ｈｐ抗体检测不宜用于临床诊断，

而更适用于Ｈｐ感染的流行病学调查，且应以Ｕｒｅ

抗体为主，ｃａｇＡ抗体和ＶａｃＡ抗体为辅。

（２）Ｈｐ粪便抗原检测（ＨｐＳＡＴ）：该法简单、

准确，敏感性达８０％一９５％，特异性达７５％一

１００％，目前认为应用前景良好，主要有酶免疫检

测（ＥＬＩＳＡ）和ＨｐＳＡ免疫快检卡¨０｜。ＥＬＩＳＡ检测

中目前运用的抗体有多克隆抗体和单克隆抗体。多

克隆抗体在制备中缺乏特异性和统一性，难以保证

质量稳定，且存在交叉反应，假阳性相对偏高；而

单克隆抗体相对可提高检测的特异性和准确性。

ＨｐＳＡ免疫快检卡则是一种基于横向流动谱技

术，使用高效单克隆抗体快速免疫层析实验检测

Ｈｐ抗原的方法。其最大特点是操作简便、快捷，

５ｍｉｎ后即可出结果，技术要求低，可在实验室外

操作，但准确性不如ＥＬＩＳＡ。有报道，当待检粪便

未及时于－２０＂Ｃ保存时，ＨｐＳＡＴ的敏感性和特异性

会有所降低¨¨。另外，取５岁以下小孩的新鲜粪

便进行ＨｐＳＡＴ，结果显示敏感性仅仅为６５％，可

能是粪便中Ｈｐ浓集太低的缘故。与组织切片染

相比，在Ｈｐ根除治疗后的诊断中，ＨｐＳＡＴ的准确

度较低，因而该方法一般用于初次诊断，而不适用

于治疗后的复查。

（３）尿液抗Ｈｐ抗体的检测：尿液样本的采集

无创性，均一性好，细菌污染机会小。标本静置片

刻，无需离，ｔ∑，ｅＰ可直接上样检测。但尿液中的免疫

球蛋白或其碎片含量极低，因此，检测尿液抗体用

的包被抗原浓度通常是检测血清抗体的２０倍，温

万方数据

育时间亦需延长ｌ倍。研究结果证明，检测尿液抗

ＨｐＩｇＧ的准确性基本上与血清学检测方法相同，

但易受高蛋白尿、饮水稀释和ｐＨ变化等因素的影

响‘１２ｌ。

三、其他诊断方法

１．胃血素指数测定

有研究认为，当感染Ｈｐ而引起胃炎时，胃黏

膜血素浓度相关指数（ＩＨｂ）平均值会趋于高

值，而当Ｈｐ根除治疗成功后，胃炎痊愈，ＩＨｂ平

均值则趋于低值。国内有研究显示：Ｈｐ阳性慢性

胃炎患者ＩＨｂ值明显高于Ｈｐ阴性慢性胃炎患者；

Ｈｐ根除成功患者ＩＨｂ值明显低于根除治疗前，而

根除Ｈｐ不成功患者ＩＨｂ值与根除治疗前相比差别

不大，提示测定胃ＩＨｂ值对Ｈｐ感染和Ｈｐ根除治

疗后评价是有价值的，但ＩＨｂ设定值为多少对Ｈｐ

感染诊断还需进一步研究¨３｜。

２．放大内镜检查

常规胃镜检查Ｈｐ相关性胃炎表现为黏膜充

血、水肿、糜烂及黏膜结节样病变，但缺乏特异

性。放大内镜在放大倍数及图像清晰度方面都有明

显改进，可以很好地对正常胃黏膜和Ｈｐ相关性病

变胃黏膜进行鉴定¨４Ｉ。

胃窦结节被公认为是Ｈｐ相关性胃炎的特征，

在５７．１％的未发生胃溃疡的Ｈｐ感染者中和１００％

的未发生十二指肠溃疡的Ｈｐ感染者中均有发现，

而且在和儿童中有较高的阳性预测值和较好的

重复性。胃窦表面异常纹理、胃窦浸蚀以及胃体表

面头状突起这三种内镜特征也被认为与Ｈｐ相关

性胃炎有关。其中，胃体表面头状突起对于Ｈｐ

相关性胃炎诊断的阳性预测值最高（７０％）。而对

于胃窦浸蚀的检测，其灵敏度较低，特异性较高。

无Ｈｐ感染的正常胃体黏膜表现为规则分布的集合

静脉，是Ｈｐ阴性胃体黏膜的特征性图像。而Ｈｐ

相关性病变胃黏膜由于胃黏膜细胞发生炎症而使集

合静脉观察不清楚。研究表明，当放大内镜检查存

在特征性图像且不存在胃窦结节时，预测胃黏膜未

受Ｈｐ感染的准确度可达９９．３％。据此，通过放大

内镜判断胃黏膜感染Ｈｐ与否相对来说是足够的，

无需进行后续检测，但一定程度上受制于个人主观

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判断。另有研究表明，炎症细胞浸润、胃黏膜上皮

表面退化甚至微血管破裂等病变都能导致集合静脉

的消失；在Ｈｐ根除治疗后三年内，患者可依旧存

在胃窦结节，且特征性图像不明显。所以，通过放

大内镜检查不适用于对近期接受治疗的患者进行

Ｈｐ感染评价。目前，放大内镜检查技术提高了诊

断的准确性，并且能够检测Ｈｐ相关性胃炎的其它

症状（如胃萎缩和胃上皮化生）ｕ５１。

３．窄频带成像（ＮＢＩ）

ＮＢＩ是近年来发展起来的一种新技术，其工作

原理与常规影像内窥镜系统类似，不同的是在现有

的红一绿一蓝滤光器技术的基础上，采用更窄频带的

红一绿一蓝滤光器以提高分辨率，与内窥镜放大检查

联用可以更准确的提供并区分胃黏膜及其血管模式

的图像¨６Ｉ，发现常规内窥镜检查易忽略的胃黏膜

细小损伤，为早期诊断出胃腺癌和定向获取活检标

本提供帮助。由于ＮＢＩ主要受毛细血管内血红蛋

白对光的吸收的影响，亦可清楚区分胃体和胃窦处

黏膜及其血管模式的差异。正常人胃组织的ＮＢＩ

显示，胃内毛细血管网分布规则，而Ｈｐ感染者胃

组织的毛细血管网分布密度减少，胃黏膜图像不规

则，可能是由于Ｈｐ感染引起显著的水肿炎症而使

得图像模糊，也可能是因为慢性Ｈｐ胃炎所致。

ＮＢＩ检测Ｈｐ感染者以毛细血管网分布密度减少为

主要特征的不规则胃黏膜图像的敏感性为７５％，

特异性为８８％，但不能区分正常的和伴有轻度胃

炎的胃黏膜图像。随着该技术的不断发展，有望用

于胃腺癌、食道癌以及结肠息肉患者的早期、有效

诊断。

参考文献

ｌ张帅清．如何提高幽门螺杆菌培养阳性率．中国卫生检

验杂志．２００７，１７（４）：７５９－７６０．

２姚海英．幽门螺杆菌诊断现状．医学信息，２００５，１８

（１０）：１４０５—１４０７．

３谭昌成，施理．幽门螺杆菌临床分离株尿素酶基因及活

性多样性．现代消化及介入诊疗，２００８，１３（１）：１８－２１．

４杨学文，王礼文，缪界平．ＰＣＲ扩增１６ＳｒＲＮＡ基因检测

万方数据

幽门螺杆菌的特异性研究．陕西医学检验，２０００，１５

（２）：２１－２２．

５吕农华，杨桢．幽门螺杆菌临床检验方法评价及选择．

中国实用内科杂志，２００８，２８（９）：７２０－７２２．

６汪英，李建生．幽门螺杆菌感染“Ｃ尿素呼气试验检

测体会．郑州大学学报（医学版），２００８，４３（１）：１７２—

１７３．

７易朝晖，詹珊．１３Ｃ尿素呼气试验对根除幽门螺杆菌

疗效的观察．海南医学，２００ｒ７，１８（１１）：３０－３１．

８Ｔｕｅｃｉ

Ａ，ＢｉｓｃｅｇｌｉａＭ，ＲｕｇｇｅＭ，ｅｔ

ａ１．Ｃｌｉｎｉｃａｌｕｓｅｆｕｌｎｅｓｓｏｆ

ｇａｓｔｒｉｃ－ｊｎｉｃｅａｎａｌｙｓｉｓ

ｉｎ

２００７：ｔｈｅａｔｏｎｅｔｈａｔｔｈｅｂｕｉｌｄｅｒｓｒｅ．－

ｊｅｃｔｅｄｈａｓｂｅｃｏｍｅｔｈｅｃｏｒｎｅｒｓｔｏｎｅ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ

Ｅｎｄｏｓｃｏｐｙ，

２００７，５：８８１－８９０．

９张虹雨，周曾芬，董树强，等．幽门螺杆菌抗体检测分

析．胃肠病学和肝病学杂志，２００８，１７（２）：１３３．１３５．

１０丁元军．幽门螺杆菌抗原学诊断．医学综述，２００７，１３

（１３）：１０２２—１０２４．

Ｉ１

ＫｕｌｏｇｌｕａＺ，ＫａｌｌａｌｌａＡ，ＫｉｒｓａｅｌｉｏｇｌｕＣＴ．ｅｔ

ａ１．Ａ

ｒａｐｉｄ

ｌａｔｅｒａｌｆｌｏｗｓｔｏｏｌ

ａｎｔｉｇｅｎｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ

ａｎｄ１４Ｃ－ｉ１１．ｅａｂｒｅａｔｈ

ｔｅｓｆｆｏｒｔｈｅ

ｄｉａｇｎｏｓｉｓ

ａｎｄｅｒａｄｉｏａｔｉｏｎｏｆＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ

ｐｙｌｏｒｉ

ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｉｎ

ｃｈｉｌｄｒｅｎ．ＤｉａｇｎｏｓｔｉｃＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ

ａｎｄＩｎｌｅｔ・

ｔｉｏｕｓ

Ｄｉｓｅａｓｅ，２００８，９：１－６．

１２左赞．尿液抗幽门螺杆菌抗体检测研究进展．实用医院

临床杂志，２００８，５（２）：８２－８３．

１３王斌，徐少勇，常青，等．胃血素指数的测定对幽门

螺杆菌的诊断价值．中国内镜杂志，２００５，ｌｌ（６）：６１４—

６１６．

】４林香春，顾雁，李玉红，等．放大胃镜对幽门螺杆菌相

关性胃炎的诊断价值．中国内镜杂志，２００７，１３（８）：

７８９－７９１．

１５

Ｍａｅｈａｄｏ

ＲＳ，ＶｉｆｉａｔｏＡ，ＫａｗａｋａｍｉＥ，ｅｔ

ａ１．Ｔｈｅｒｅｇｕｌａｒ

ａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ

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ａｒｅｈｉ０１ｌｙｉｎｄｉｃａｔｉｖｅｏｆＨｅｌｉｅｏｂａｅｔｅｒ

ｐｙｌｏｆｉ

ｕｎｉ如ｔｅｄ

ｇａｓ—

ｔｒｉｃ

ｍｕｃｏｓａ．Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ

ａｎｄＵｖｅｒＤｉｓｅａｓｅ，２００８．４０：６８—

７２．

１６Ｂａｎｓａｌ

Ａ，Ｕｌｕｓａｒａｃ０，ＭａｔｈｕｒＳ，ｅｔａ１．Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ

ｂｅ．

ｔｗＬ弛ｎｎａｒｒｏｗｂａｎｄ

ｉｍａｇｉｎｇ

ａｎｄ

ｎｏｎｎｅｏｐｌａｓｔｉｅｇａｓｔｒｉｃｐａ—

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ｔｒｉａｌ．ＧａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌＥｎｄｏｓｅｏ－

ＰＹ，２００８，６７，（２）：２１０－２１６．

（收稿日期２００９－０６．１６

编辑李启扬）