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白癜风维生素Ｄ受体Ａｐ　ａ　Ｉ基因多态性及其　

与免疫异常的关系　

韦海鹏’　钟永军’　李晓华　

１．北海市人民医院皮肤科，广西北海　５３６０００；２．右江民族医学院微免教研室，广西百５３３０００　

【摘要ｌ目的探讨白癜风维生素Ｄ受体Ａｐａ　Ｉ基因多态性及其与免疫异常的关系，为其临床相关研究提供参考。方法连续收　

集白癜风患者９４例作为病例组，随机抽取健康人９８例作为对照组。详细记录所有受试者的基本信息，同一条件下抽取所有　

受试者的血液样本，维生索Ｄ受体Ａｐａ　Ｉ基因多态性采用ＰＣＲ．ＲＦＬＰ技术进行监测，同时分析基因多态性与外周血免疫球蛋白　

ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＧ等相关性。结果病例组ａ等位基因频率３４．０４％明显高于对照组２０．４１％，差异比较有统计学意义（Ｐ＜０．　）；显　

性模型结果显示，病例组Ａａ＋ａａ基因型分布频率高于对照组，差异比较有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）；隐形模型结果显示，与对照　

组相比，病例组ＡＡ＋Ａａ基因型分布频率较高，但差异比较不明显（Ｐ＞Ｏ．０５）。病例组血清ＩｇＡ水平明显低于对照组血清ＩｇＡ水　

平，两组间差异比较有统计意义（Ｐ＜Ｏ．０５）；．ＫＡａ及ａａ基因型血清ＩｇＡ水平亦明显低于对照组血清ＩｇＡ水平，差异比较亦有统　

计意义（Ｐ＜Ｏ．０５）；其余免疫球蛋白血清水平比较无明显差异（Ｐ＞Ｏ．０５）。结论维生素Ｄ受体Ａｐａ　Ｉ基因多态性与白癜风的发　

生存在密切的相关性，其可能通过影响机体的免疫功能，特别是血清ＩｇＡ水平发挥作用。　

【关键词】白癜风；维生素Ｄ受体；Ａｐａ　Ｉ基因；免疫异常　

【中圈分类号】Ｒ７５８．４１　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１６７２—５６５４（２０１３）０６（ａ）一０１３５—０２　

临床上，白癜风是一种以局部素脱失形成白斑为特征的　采用ＰＣＲ．ＲＦＬＰ技术检测和ＤＮＡ测序技术验证维生素Ｄ受　

常见多发性素性皮肤病，是一种获得性疾病，ｆ临床主要表现　体Ａｐａ　Ｉ基因多态性，所用引物均应用软件Ｐｒｅｍｉｅｒ５．０自行设计，上　

为皮肤素脱失进而形成的白的点或者斑片，大小从几毫米　游引物：５‘．ＣＡＡＣＣ　ＡＡＧＡＣ　ＴＡＣＡＡ　ＧＴＡＣＣ　ＧＣＧＴＣ　ＡＧＴＧＡ　

到数厘米不等，其周围为正常皮肤，随着病情的发展，素脱失　．３‘；下游引物：５‘＇ＴＧＧＣＧ　ＧＣＡＧＣ　Ｇ｝ＧＡＴＧ　ＴＡＣＧＴ　ＣＴＧＣ．３‘，并　

症状会逐渐扩大，形成更大的皮损［　１】。遗传和流行病学研究发　经ＧＥＮＥＢＡＮＫ中ＢＬＡＳＴ分析其特异性高，由上海英俊生物技术公　

现　】，白癜风患者可能有一定的遗传缺陷倾向，使黑素细胞容易　司合成。用的限制性内切酶Ａｐａ　Ｉ，总反应体系２Ｏ　Ｌ，包括ＰＣＲ产物　

被破坏，最终引起白癜风的发生。维生素Ｄ受体基因定位于１２号　１　ｇ，１０ｘＮＥＢ缓冲液２　Ｌ，限制性内切酶０．５１ｘＬ（ＮＥＢ公司），其余用　

染体长臂１区３带上，存在多个限制性内切酶酶切位点。研究已　灭菌双蒸水填至２０￣ｔＬ，６５ｏＣ（７５℃）温育１６ｈ，３％琼脂糖凝胶‘溴化　

证实【４】，维生索Ｄ受体基因与皮肤黑素细胞的数量变化有一定　乙锭染），电泳３０　ｍｉｎ，紫外线下观察，摄影。将酶切产物与ＤＮＡ　

的关系。在此背景下，本研究即探讨白癜风维生素Ｄ受体Ａｐａ　Ｉ　片断长度标准物比较以鉴定基因型。同时分析基因多态性与外周血　

基因多态性及其与免疫异常的关系，为其临床研究提供可参考　免疫球蛋Ｉ￣ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＧ等相关性。　

依据。　１．３统计学分析　

１资料与方法　数据处理采用ＳＰＳＳ　１１．５软件包进行。体代表性采用Ｈａｒｄｙ．　

１．１一般资料　Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡法进行检测，计量资料及基因型、等位基因频率的比　

连续收集２０１１年１２ｆｌ－２０１３年１月该院皮肤科门诊的白癜风　较采用ｘ２检验，计量资料经检验为正态分布者，且方差齐者（均数　

患者９４例作为病例组，按照中华医学会白癜风诊断标准进行诊　±标准差）采用ｔ检验。检验ＪＰ＜Ｏ．０５被认为有统计学意义。　

断，其中男性５３例，女性４１例，年龄８－６３岁，平均年龄（２８．６±８．２）　

２结果　

岁。同时随机选取无血缘关系的健康人９８例作为对照组，其中　２．１基因多态性分析　

男性５５例，女性４３例，年龄８—６７岁，平均年龄（２８．７±８．１）岁。两组问　维生素Ｄ受体Ａｐａ　Ｉ基因的ＰＣＲ扩增产物片段长度为７６０　ｂｐ，　

性别、年龄等基本资料比较差异不明显（Ｐ＞０．０５），具有临床可比　包含Ａｐａ　Ｉ酶切片段。ＡＡ基因型（野生型）不能被酶切断，仅见７４０　

性。所有受试者均排除外伤、血液系统疾病、急性感染、恶性肿瘤　

ｂｐ　１种片段；Ａａ基因型为杂合子。可见７４０　ｂｐ、５２０　ｂｐ和２２０　ｂｐ　３　

等疾病；既往有肝肾功能不全等。纳入对象均不存在血缘关系，且　

种片段；ａａ基因型（突变纯合子）的扩增产物可被完全切断，电泳可　

均签署了知情同意书，符合医院相关管理条例。　见５２０　ｂｐ和２２０　ｂｐ　２种片段。　

１．２方法　２．２维生素Ｄ受体基因单位点分析　

入院后对所有受试者的基本信息及相关病史进行详细的调　病例组、对照组基因型及等位基因频率分布均符合Ｈａｒｄｙ．　

查，病例组患者于入院后次日晨、对照组于参与本课题当日同一条　Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡检验（Ｐ＜０．０５），本研究的样本来自同一人，　

件下抽取所有受试者的血液样本４　ｍＬ，其中２　ｍＬ应用检测外周　两组间基因型比较无统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０５）。病例组ａ等位基因　

血免疫球蛋白ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＧ等相关生化指标，另外２　ｍＬ用于提　

频率３４．０４％明显高于对照组２０．４ｌ％，差异比较有统计学意义　

取自细胞基因组ＤＮＡ。　（Ｐ＜０．０５）；显性模型结果显示，病例组Ａａ＋ａａ基因型分布频率　

高于对照组，差异比较有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；隐形模型结果显　

ｆ作者简介】韦海鹏（１９７９一），男，本科，学士，主治医师。研究方向：皮　示，与对照组相比，病例组ＡＡ＋Ａａ基因型分布频率较高，但差异比　

肤性病　较不明显（Ｐ＞０．０５）（表１，２）。　

中国卫生产业　１３５