中药金银花提取物降糖作用实验研究
-
-4-
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作者简介:
胡青莲(1971-),山东东明人,主治医师。
编辑:弓良彦编号:EA-3180322239(修回:2018-07-07)
中药金银花提取物降糖作用实验研究
Experimentalstudiesonhypoglycemiceffectsofextractsfromhoneysuckle
叶清华
(湖北省荆门市掇刀人民医院,湖北荆门,
448124
)
R284
.
5
文献标识码:
A
文章编号:
1674
-
7860
(
2018
)
19
-
0004
-
04
中图分类号:
目的:探讨中药金银花提取物的降糖作用。方法:从四种金银花地方品种忍冬(LMPB)、山银花(LCPB)、红腺忍
【
摘要
】
冬(LHPB)、毛花柱忍冬(LFPB)的花蕾中提取多糖组分,采用链脲佐菌素(STZ)诱导制造
Ⅱ
型糖尿病大鼠模型,设正常对照
组(NC),模型对照组(STZ),金银花阳组(STZ+LMPB;STZ+LCPB;STZ+LHPB;STZ+LFPB)。阳组每日分别
口服该四种提取物800mg/kg,共42天。观察各组大鼠血糖和胰岛素水平及血糖、血脂及代谢酶活性指标。结果:统计分析结果表
明:与对照组及模型组比较,阳组食物和水摄入量减少(
P
<
0.05,
P
<
0.01),血糖和胰岛素水平降低(
P
<
0.01,
P
<
0.05)。
同时总胆固醇(TC,45.8%
~
51.0%,
P
<
0.05),总甘油三酯(TG,50.6%
~
53.8%,
P
<
0.01),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C,
71.2%
~
76.3%,45.2%
~
50.0%,,高密度脂蛋白胆固醇显著升高(HDL-C,
P
<
0.01)和极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C,
P
<
0.01)
21.6%
~
24.3%,
P
<
0.05)。同时阳物组血清ALT、AST和GGT显著降低(
P
<
0.05),肝脏CAT、SOD和GSH显著增加(
P
。结论:上述结果表明,四种中药金银花提取物多糖组分具有显著的降血糖作用,可作为
Ⅱ
型糖尿病功能性食品的有效成分。
<
0.05)
金银花;多糖;降糖
【
关键词
】Ⅱ
型糖尿病;
Objective:ToinvestigatethehypoglycemiceffectofextractofJinyinghua(金银花).Methods:Polysaccharidefracti
【
Abstract
】
wereextractedfromthebudsoffourJinyinghua,LMPB,LPCB,eptozotocin(STZ)wasappliedtoestablishtypeII
diabeticratmodel,setthenormalcontrolgroup(NC),modelgroup(STZ),honeysucklepositivedruggroup(STZ+LMPB,STZ+LCPB,
STZ+LHPB,STZ+LFPB).Thepositivedruggroupwasgiventhefourextracts800mg/kgdaily,odglucoseandinsulin
levels,andtheindexesofbloodglucose,bloodlipids,s:Statisticalanalysis
CJCM
中医临床研究
2018
年第
10
卷第
19
期
-5-
showedthatcomparedwiththecontrolandmodelgroups,foodandwaterintakeinthepositivedruggroupweredecreased(
P<
0.05,
P<
0.01),
andbloodglucoseandinsulinlevelsweredecreased(
P<
0.01,
P<
0.05).Atthesametime,totalcholesterol(TC,45.8%~51.0%,
P<
0.05),total
triglycerides(TG,50.6%~53.8%,
P<
0.01),lowdensitylipoproteincholesterol(LDL-C,71.2%~76.3%,
P<
0.01)andverylow-densitylipoprotein
cholesterol(VLDL-C,45.2%~50.0%,
P<
0.01),high-densitylipoproteincholesterolweresignificantlyincreased(HDL-C,21.6%~24.3%,
P<
0.05).
SerumALT,AST,andGGTinthepositivedruggroupweresignificantlylower(
P<
0.05),andliverCAT,SOD,andGSHweresignificantly
increased(
P<
0.05).Conclusion:TheaboveresultsindicatethatthepolysaccharidecomponentsofthefourextractsofJinyinghuahavesignificant
hypoglycemiceffects,andcanbeusedaseffectiveingredientsoftypeIIdiabetesfunctionalfoods.
Jinyinghua;Amylose;TypeIIdiabetes;Gibenclamide
【
Keywords
】
doi:10.3969/.1674-7860.2018.19.002
糖尿病是全球公共卫生关注的一种主要的内分泌疾病,
其特点是体内产生胰岛素功能缺陷(Ⅰ型糖尿病,
T1DM
)
或胰岛素(Ⅱ型糖尿病,
T2DM
)[1
,2]。
T2DM
已严重威胁
人们的健康状况,其占所有糖尿病的
90%
~
95%
,其特征
是持续高血糖、高胰岛素血症、胰岛素抵抗、葡萄糖耐受
不良和受损[3,4]。然而,尽管临床上已有治疗和控制
T2DM
的药物,如双胍类、磺酰脲类和葡萄糖苷酶抑制剂,这些药
物的长期使用可能导致一些副作用,包括低血糖,肝肾功能
障碍[5
,6]。因此,随着
T2DM
发病率的不断上升,寻找新的
替代治疗方法来预防和治疗
T2DM
迫在眉睫。
药用植物多糖是由从天然药用植物中分离的,由糖苷
键聚合
10
个以上到上万个的单糖及单糖衍生物的具有一定
生物活性的高分子化合物,其不仅可作为能量资源及组织
细胞的结构物质,而且还参与和介导了对各种生命现象的
调控,具有抗寄生虫、抗肿瘤、抗菌、降血糖、抗氧化、
抗病毒、抗血栓、抗辐射、抗衰老、降血脂、免疫调节等
作用[7]。金银花是我国传统的药食两用植物,主要含有绿
原酸、类黄酮等生理活性成分。中医认为金银花具有抗菌、
抗氧化、增强免疫、保护肝功能等诸多功效,目前对金银
花已有较广泛和深入的研究,但其是否具有降血糖的作用,
目前还未见研究报道。本文从四种金银花中提取多糖成分,
旨在探讨四种金银花多糖的抗糖尿病作用,为
T2DM
中药
研发提供理论依据。
1
材料与方法
1.1多糖的来源
试验所用四种金银花多糖由荆楚理工学院生物学院提取
并鉴定,多糖采用水提醇沉的方法提取,由硫酸
-
苯酚法测
定四种多糖的含量。将提取后的多糖用去离子水稀释成所需
要的浓度,于
4
℃冰箱保存备用。
1.2试验动物、试剂及仪器
试验动物:健康雄性大鼠[荆楚医动字(新)jcut
2016-0013]
96
只进行造模。适应性喂养一周,禁食不禁
水
20h
,采用链脲佐菌素(
STZ
)腹腔注射造模。一周后
大鼠空腹血糖≥
16.7mmol/L
即为造模成功。金银花品种
购于荆门市药材供销公司,
STZ
购于
Sigma
公司,大鼠
尿蛋白定量试剂盒、
TG
试剂盒、
T-CHO
试剂盒和
AGEs
ELISA
检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所。
1.3试验设计
试验分组如表
1
所示。
表
1
试验设计(
mg
/
L
)
处理
忍冬山银花红腺忍冬毛花柱忍冬
(LMPB)(LCPB)(LHPB)(LFPB)
空白对照组(NC)0000
模型对照组(STZ)0000
LMPB阳物组
(STZ+LMPB)
60000
LCPB阳物组
(STZ+LCPB)
06000
LHPB阳物组
(STZ+LHPB)
00600
LFPB阳物组
(STZ+LFPB)
00060
1.4测定指标
血清胰岛素含量的测定:通过竞争性抑制法测定血清胰岛
素,
ELISA
方法按照试剂盒制造商的说明进行。
血脂含量的测定:大鼠处死后取血
4
℃条件下静置
2h
,离
心收集血清,按试剂盒说明书测定血清
TG
、
TC
、
LDL-C
、
VLDL
、
HDL-C
水平。
血清和肝脏关键激酶的测定:大鼠处死后取血清,检测
2
型糖尿病大鼠糖代谢关键酶丙氨酸转氨酶(
ALT
)、天冬氨酸
转氨酶(
AST
)、
γ-
谷氨酰转肽酶(
GGT
)活性,取肝脏组织
检测过氧化氢酶(
CAT
)、超氧化物歧化酶(
SOD
)和谷胱甘
肽酶(
GSH
)活性,酶活性测定采用南京建成生物工程研究
所试剂盒说明方法进行。
1.5统计分析
采用
SAS9.2
软件中的
GLM
对本试验的数据进行统计分
析,所有试验数据均采用(平均数±标准差)来表示。以
P
<
0.05
表示显著性差异具有统计学意义,用
Duncan
氏法作
多重比较。
2
结果
2.1不同金银花多糖处理对大鼠血糖、胰岛素和胰岛素受体的影响
如表
2
所示,与正常对照组相比,
STZ
诱导的糖尿病
大鼠胰岛素水平显著升高(
P
<
0.05
),而血糖和胰岛素受
体
HOMA-IR
(
P
<
0.01
)极显著增加;口服
LMPB
、
LHPB
、
LFPB
、
LCPB
各
42
天后,与
STZ
模型组比较,各给药组胰
岛素水平显著降低(
P
<
0.05
),血糖和
HOMA-IR
极显著降
低(
P
<
0.01
)。说明这些多糖组分能够抑制糖尿病大鼠空腹
血糖和改善胰岛素抵抗。
-6-
ClinicalJournalofChineseMedicine2018Vol.(10)No.19
表
2
不同金银花多糖组分对
2
型糖尿病大鼠血糖胰岛素和胰岛素受体的影响
处理
空白对照组(NC)
模型对照组(STZ)
LMPB阳物组(STZ+LMPB)
LCPB阳物组(STZ+LCPB)
LHPB阳物组(STZ+LHPB)
LFPB阳物组(STZ+LFPB)
血糖(0d)
6.5±0.2
22.4±2.1**
22.8±2.2*
20.9±2.1*
21.2±2.1*
21.8±1.9*
血糖(42d)
7.1±0.2
23.1±2.4**
12.8±1.1*
12.2±1.2*
11.7±1.4*
12.7±1.2*
胰岛素(42d)
24.3±1.9
32.4±1.8*
24.0±1.8
24.2±1.9
23.9±2.4
24.2±1.6
胰岛素受体HOMA-IR(42d)
7.7±0.5
39.9±4.1**
14.1±1.6*
12.4±1.5*
13.6±1.6*
14.2±1.5*
注:“*”表示差异显著(
P
<0.05),“**”表示差异极显著(
P
<0.01),未标者差异不显著(
P
>0.05);以下各表同。
2.2不同金银花多糖处理对大鼠血脂水平的影响
由表
3
可知,与空白对照组比较,
2
型糖尿病大鼠模型
组血浆
TG
、
TC
、
VLDL
、
HDL-C
均极显著升高(
P
<
0.01
)。
而
LMPB
、
LHPB
,
LFPB
和
LCPB
治疗
T2DM
后,其
TG
、
TC
、
VLDL-C
、
HDL-C
组显著降低,分别为
45.8%
~
51.0%
、
50.6%
~
53.8%
,
71.2%
~
76.3%
和
45.2%
~
50.0%
。此外,
表
3
不同金银花多糖处理对大鼠血脂水平的影响
处理
空白对照组(NC)
模型对照组(STZ)
LMPB阳物组(STZ+LMPB)
LCPB阳物组(STZ+LCPB)
LHPB阳物组(STZ+LHPB)
LFPB阳物组(STZ+LFPB)
TC(mmol/L)
1.53±0.14
3.10±0.22**
1.61±0.19*
1.66±0.22*
1.68±0.19*
1.52±0.22*
2
型糖尿病对照组与正常对照组比较,
HDL-C
明显降低
(
P
<
0.05
)。然而
LMPB
、
LHPB
,
LFPB
和
LCPB
治疗后
HDL-C
显著升高(
P
<
0.05
),增加了
21.6%
~
24.3%
。说明
这四种多糖组分对血脂异常、动脉粥样硬化、冠心病等糖尿
病并发症有明显的治疗作用。
TG(mmol/L)
1.65±0.14
3.40±0.23**
1.68±0.10*
1.60±0.11*
1.57±0.11*
1.58±0.15*
HDL-C(mmol/L)
0.92±0.09
0.74±0.11**
0.90±0.13**
0.90±0.17**
0.91±0.16**
0.92±0.13**
LDL-C(mmol/L)VLDL-C(mmol/L)
0.31±0.07
1.56±0.24**
0.37±0.10*
0.45±0.11*
0.45±0.11*
0.39±0.10*
0.30±0.07
0.62±0.12**
0.34±0.09*
0.32±0.06*
0.31±0.08*
0.32±0.09*
2.3不同金银花多糖处理对大鼠关键代谢酶活性的影响
如表
4
所示,与正常对照组相比,糖尿病大鼠(
STZ
)丙
氨酸转氨酶(
ALT
)、天冬氨酸转氨酶(
AST
)、
γ-
谷氨酰转肽
酶(
GGT
)活性各极显著升高了
4.2
倍(
P
<
0.01
),
5.0
倍(
P
<
0.01
)及
3.3
倍(
P
<
0.01
)。口服
LMPB
、
LHPB
、
LFPB
、
LCPB
各
42
天后,与
STZ
模型组比较,阳物组大鼠血清
ALT
、
AST
和
GGT
活性极显著降低至(
52.9
±
9.6
)~(
56.2
±
7.0
)
IU/LIU/L
(
P
<
0.01
),(
73.7
±
13.2
)~(
78.8
±
16.1
)(
P
<
0.01
)
表
4
不同金银花多糖处理对大鼠关键代谢酶活性的影响
处理
空白对照组(NC)
模型对照组(STZ)
LMPB阳物组(STZ+LMPB)
LCPB阳物组(STZ+LCPB)
LHPB阳物组(STZ+LHPB)
LFPB阳物组(STZ+LFPB)
血清ALT
42.1±5.1
170.8±9.62.1**
56.2±7.0*
52.9±9.6*
55.7±6.9*
55.8±6.9*
血清AST
72.1±11.2
363.1±22.4**
78.8±16.1*
76.2±14.2*
73.7±14.4*
73.7±13.2*
IU/L
和(
43.9
±
6.4
)~(
44.2
±
6.9
)(
P
<
0.01
)。与正常对照组
STZ
诱导的糖尿病大鼠血清中
HK
、
SDH
和
MDH
活性均比较,
有显著性差异(
P
<
0.01
,
P
<
0.01
)和
P
<
0.05
)。口服
LMPB
、
LHPB
、
LFPB
、
LCPB
各
42
天后,与
STZ
模型组比较,糖尿病大
鼠肝脏过氧化氢酶(
CAT
)、超氧化物歧化酶(
SOD
)和谷胱甘肽
酶(
GSH
)活性含量显著分别升高至(
82.4
±
8.5
)~(
84.2
±
8.5
)
U/mgU/mg
(
P
<
0.01
)、(
297.3
±
12.5
)~(
302.7
±
13.6
)(
P
<
0.01
)
和(
9.4
±
0.4
)~(
9.8
±
0.4
)
mg/g
(
P
<
0.05
)。
血清GGT
41.3±4.9
136.4±9.8**
44.0±6.8*
44.2±6.9*
43.9±6.4*
44.2±6.6*
肝脏CAT
87.7±6.5
29.9±7.1**
84.1±8.6*
82.4±8.5*
83.6±8.6*
84.2±8.5*
肝脏SOD
302.9±11.4
168.6±12.1**
302.2±13.4*
297.3±12.5*
301.8±11.9*
302.7±13.6*
肝脏GSH
9.9±0.6
4.7±0.5**
9.8±0.4*
9.4±0.4*
9.5±0.5*
9.5±0.5*
3
讨论
由以上结果可知,本试验所得的四种金银花多糖组分能
够调控
2
型糖尿病模型大鼠空腹血糖表达和改善胰岛素抵
抗。本报道表明忍冬(
LMPB
)、山银花(
LCPB
)、红腺忍冬
(
LHPB
)、毛花柱忍冬(
LFPB
)可被用作日本落叶松的替代
品,用于中医治疗
T2DM
。以前有报道指出,金银花中绿原
酸、类黄酮类物质对
THP-1
细胞中的胆固醇和类黄酮显示出
强烈的抗动脉粥样硬化作用[8],本研究证实该四种金银花多
糖在血脂异常与心血管疾病方面的预防作用,且这种预防作
用来自于多糖成分。本研究为深入开展金银花的药效物质基
础研究奠定了基础,同时也为金银花组分配伍降血糖新药开
发提供了理论依据。
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-7-
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α
表达及胰岛素抵抗的影响[J].中国糖尿病杂志,2011,19(3):197-
200.
作者简介:
叶清华(1966-),主治医师,从事内科临床工作15年,先后
在武汉同济医院、湖北省人民医院等医院进修学习,擅长心血管、内
分泌、肾内科等系统疾病的诊断和治疗。
编辑:田杏茹编号:EA-4180403019(修回:2018-07-08)
通腹饮对腹腔内高压症危重患者的腹内压变化率及
炎性因子的影响研究
EfficacyofTongfuYinonintra-abdominalpressurechangerateand
inflammatoryfactorsofpatientswithsevereintra-abdominalhypertension
谷欣刘敏桑云华龙宏杰
(广州医科大学附属惠州医院,广东惠州,
516000
)
R322
.
2+7
文献标识码:
A
文章编号:
1674
-
7860
(
2018
)
19
-
0007
-
04中图分类号:
目的:探讨通腹饮对腹腔内高压症(IAH)危重患者的腹内压变化率及炎性因子的影响。方法:本研究选取48例IAH
【
摘要
】
危重患者作为研究对象,随机分为对照组和观察组各24例,对照组给予常规治疗,观察组在此基础上给予通腹饮治疗,观察两组治
疗前后IAH分级、临床指标、腹内压变化率、急性生理学与慢性健康状况评分
Ⅱ
(APACHE
Ⅱ
)、血清炎性因子变化,并统计不良反
应发生率及28天病死率。结果:治疗后两组IAH分级均明显优于治疗前(
P
<
0.05),观察组明显优于对照组(
P
<
0.05);治疗后两
组eGFR均明显升高(
P
<
0.05),观察组明显高于对照组(
P
<
0.05),且观察组肠鸣音恢复时间、首次排便时间、ICU住院时间均明
显短于对照组(
P
<
0.05);治疗后两组APACHE
Ⅱ
评分均明显降低(
P
<
0.05),观察组明显低于对照组(
P
<
0.05),且观察组腹内
压变化率明显小于对照组(
P
<
0.05);治疗后两组血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-
α
(TNF-
α
)、白细胞介素-6(IL-6)、
降钙素原(PCT)水平均明显降低(
P
<
0.05),观察组各因子水平明显低于对照组(
P
<
0.05);观察组不良反应发生率明显低于对照
组(
P
<
0.05),两组28d病死率比较无明显差异(
P
>
0.05)。结论:通腹饮治疗IAH危重患者能够有效降低腹内压变化率及血清炎
性因子水平,促进患者胃肠功能恢复,保护肾功能,且不良反应发生率及28d病死率低,临床疗效较好。
通腹饮;腹腔内高压症;腹内压变化率;炎性因子
【
关键词
】
Objective:ToinvestigatetheefficacyofTongfuYin(通腹饮)onintra-abdominalpressurechangerateandinflammatory
【
Abstract
】
s:48caseswereselectedastheresearchsubjectsandwererandomlydividedintothecontrol
groupandtheobservationgroup,ervationgroupwastreated
classification,clinicalindex,intra-abdominalpressurechangerate,acutephysiology,APACHEIIand
seruminflammatoryfacersereactiand28days
s:Aftertreatment,theIAHclassificatiintwogroupsweresignificantlybetter(
P<
0.05),
andthatintheobservationgroupwasobviouslysuperiortothecontrolgroup(
P<
0.05).Aftertreatment,theeGFRintwogroupswas
significantlyincreased(
P<
0.05),andthatintheobservationgroupwassignificantlyhigherthanthecontrolgroup(
P<
0.05).Therecovery
timeofbowelsound,thefirstdefecationtime,ICUhospitalizationtimeintheobservationgroupweresignificantlyshorterthanthosein
thecontrolgroup(
P<
0.05).Aftertreatment,thescoresofAPACHEIIintwogroupsweresignificantlydecreased(
P<
0.05),andthatinthe
observationgroupwassignificantlylowerthanthecontrolgroup(
P<
0.05).Thechangerateofintra-abdominalpressureintheobservation
groupwassignificantlylowerthanthatinthecontrolgroup(
P<
0.05).Aftertreatment,hs-CRP,TNF-
α
,IL-6andPCTlevelsintwogroups
weresignificantlydecreased(
P<
0.05),andthoseintheobservationgroupweresignificantlylowerthanthoseinthecontrolgroup(
P<
0.05).
Adversereactiintheobservationgroupweresignificantlyfewerthanthecontrolgroup(
P<
0.05).Therewasnosignificantdifferenceof
the28daysmortalityratebetweentwogroups(
P>
0.05).Conclusion:TongfuYincaneffectivelyreducethechangerateofintra-abdominal
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