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测定天王补心丸和归脾丸中细叶远志皂苷的含量

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2022年4月17日发(作者:湖北大学排行榜)

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第32卷第l6期 

2007年8月 

中国中药杂志 

China Journal of Chinese Materia Medica 

V01.32.Issue 16 

August,2007 

合体内试验一同评价。 

体内转运试验中挑选的是健康志愿者,与溃疡 

性结肠炎患者的胃肠道环境与健康状态是不同的, 

应考虑到差异性。 

进一步研究。 

[参考文献】 

[1]中国药典[S].一部.2000:附录xc62. 

[2] M Turkoglu,T Ugurlu./n vitro evaluation of pectin·HPMC eom- 

pression coated 5-aminosalieylic acid tablets for colonic delivery 

但目前使用的酶依赖靶向辅料研究比较有限。 

其中果胶使用最广,但果胶的亲水性是最大问题。 

试验中通过加入一定比例的HPMC,改善了亲水性, 

但是HPMC改变果胶亲水性的机制尚不清楚,有待 

[J].Eur J Pharm Biopharm,2002,53(1):65. 

[3] 闫惠俊,龙致贤,王玉蓉,等.肠安康微丸结肠靶向验证实验 

[J].中成药,2003,25(7):523. 

/n vivo/in vitro evaluation of Kangfuxin colon targeting capsules 

QIU Xue.1an ,YANG Ming2,XIE Xing.1iang2,LAI Juan ,CHEN si-wei 

(1.Chengdu University ofTraditional Chianesne Medicine,Chengdu 611730,Chia;n 

2.West Chia nSchool ofPharmacy Sichuan University,Chengdu 610041,Chia)n 

[Abstract] Objective:To evaluate the release in fixed position of pH·dependent and enzyme,dependent Kangfuxin colon targe- 

ting capsules in vivo and in vitro.Method:The dissolution was tested in vitro and X·ray radiography Was used for the evaluation in vi- 

VO.Result:After two hours pH.dependent colon targeting in man—made colon fluid,medicine release in fixed position on the whole, 

colon loc-release.Add enzyme into man—made colon,when enzyme·dependent colon targeting in it,then medicine release quickly, 

mainly release in fixed posiiton;The conveying time in vivo of pH-dependent and enzyme··dependent capsules have big individuality 

diference.In the experiment,disintegration is stabilize among individuales,between 2.0~3.5 hours.Conclusion:Kangfuxin colon 

targeting capsules of two principles all release in fixed position to achieve the goa1. 

[Key words]kangfuxin;colon targeting;dissolution;X-ray radioraphy g[责任编辑鲍雷] 

测定天王补心丸和归脾丸中细叶远志皂苷的含量 

董晓兵 ,李 军 ,姜 勇 ,董婷霞 ,屠鹏飞 ,詹华强 

2.香港科技大学中药研发中心暨生物系,香港; 

(1.澳门大学中华医药研究院,澳门; 

3.北京大学药学院 天然药物学系,北京100083) 

[摘要] 目的:建立含远志中成药中细叶远志皂苷的含量测定方法。方法:采用高效液相谱法,Alhima 

C18谱柱(4.6 mm×250 mm,5 m),流动相甲醇一0.05%磷酸溶液(65:35),检测波长202 am,流速1.0 mL· 

min~。结果:细叶远志皂苷的理论塔板数为2 500。回归方程Y=5.239×10。X一6.247×10’(r =0.999 4),线 

性范围10~500 Ixg·mL~,平均回收率为97.5%(RSD均小于3.0%),最低检出浓度为5.50峭·mL’。。结论:检 

测含远志中成药中细叶远志皂苷含量方法简便,结果准确,重现性好,可作为含远志的复方制剂质量控制标准。 

[关键词]HPLC;天王补心丸;归脾丸;远志;细叶远志皂苷;含量测定 

[中图分类号]R 284[文献标识码]A[文章编号]1001-5302(2OO6)16-1647-03 

天王补心丸和归脾丸均收载于中华人民共和国 

【收稿日期]2007.01-20 

【通讯作者] 

ust.hk 

药典2005年版一部,天王补心丸由丹参、当归、五味 

董晓兵,Tel:(00852)23587318,E—mail:dxbaa@ 

子、远志等l6味制成蜜丸,功能滋阴养血,补心安 

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第32卷第16期 

2007年8月 

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Vo1.32,Issue 16 

August,2007 

神,用于心阴不足,心悸健忘,失眠多梦,大便干 

燥…;归脾丸由党参、白术、远志等11味制成蜜丸, 

功能益气健脾,养血安神,用于心脾两虚,气短心悸, 

失眠多梦,头昏头痛,肢倦乏力,食欲不振,崩漏便 

血…。中国药典没有记载这2种中药的含量测定方 

法。远志具有安神益智的功效,在这2种中成药中 

都是重要的成分,皂苷类成分是远志的主要活性成 

分¨4 。2005年版药典中以远志酸作为对照品对远 

志药材进行含量测定…,但是远志酸是远志总皂苷 

酸水解的产物之一 ,测定其含量不能代替远志中 

总皂苷的含量。细叶远志皂苷是远志总皂苷碱水解 

生成的次级皂苷,远志总皂苷经碱水解均能转化为 

细叶远志皂苷I6' 。因此本课题组建立以细叶远志 

皂苷作为指标成分来检测远志总皂苷的含量,并对 

不同厂家生产的天王补心丸和归脾丸进行了细叶远 

志皂苷的含量测定。 

1仪器与试药 

Waters高相液相谱仪(Waters 600 Controller, 

AF在线脱气机,Waters 717自动进样器);Waters 

996二极管阵列检测器,Empower谱工作站,超声 

清洗仪(BRANSONIC,240 W,50 Hz),CH-920旋转 

蒸发仪(BUCHI)。 

细叶远志皂苷自制 (采用HPLC,IR,MS,”c— 

NMR和 H—NMR鉴定,纯度>98%),天王补心丸和 

归脾丸购于市场上不同药店,水(milli—Q,Millipore 

s.A.Molsheim,France),甲醇(谱纯,PROLA— 

BO),85%磷酸(分析纯,VWR)。 

2方法与结果 

2.1谱条件和系统适应性试验Alltima C18 

谱柱(4.6 mm×250 mm,5 I.zm);流动相甲醇 

0.05%磷酸溶液(65:35);检测波长202 nm;流速 

1.0 mL·min~;进样量1O IxL;柱温为室温;采集时 

问30 min。见图1。在谱图中,细叶远志皂苷的 

保留时间为17.2 min,与相邻峰的分离度均大于1. 

5,理论塔板数为2 500。 

2.2对照品溶液制备精密称取细叶远志皂苷5 

mg,置5 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得 

对照品储备液。 

2.3供试品溶液的制备取样品粉末(3号筛)2.0 

g,精密称定,置100 mL磨口锥形瓶中,加甲醇25 mL, 

超声处理30 min×2,滤过,合并滤液,蒸干,加10% 

NaOH溶液50 mL,加热回流2 h,冷却,加浓HC1调 

】648· 

0 5 l0 l5 20 25 30 

图1对照品与样品的HPLC图 

A.对照品;B.归脾丸;c.天王补心丸;D.归脾丸缺远志阴性对 

照;E.天王补心丸缺远志阴性对照 

pH 4~5,用正丁醇萃取3次,每次50 mL,合并正丁 

醇萃取液,回收溶剂,残渣用甲醇溶解并定容至25 

mL量瓶中,0.45 m滤膜滤过,即得供试品溶液。 

2.4阴性对照样品溶液的制备按照药典中归脾 

丸和天王补心丸的处方和制备工艺制备缺远志的阴 

性对照丸,再按上述供试品溶液的制备方法制备阴 

性对照液。 

2.5线性关系考察和最低检出浓度精密量取细 

叶远志皂苷对照品储备液适量,用甲醇稀释成系列 

浓度(/t'=6)分别进样1O ,记录谱峰面积,以 

对照品进样浓度 ( g·mL )对峰面积均值y进 

行线性回归,得回归方程Y=5.239×10。X一6.247 

×10 (r =0.999 4),细叶远志皂苷在1O~500 g 

·mL 与峰面积呈良好线性关系。 

将细叶远志皂苷对照品溶液适当稀释后,进样, 

以峰高为基线噪音3倍计算,最低检出浓度为5.5O 

Ixg·mL~。 

2.6精密度试验精密吸取同一浓度对照品溶液, 

连续进样5次,记录细叶远志皂苷保留时问和谱 

峰面积值,RSD分别为0.45%和1.07%。 

2.7重复性试验精密称取同一样品5份,分别按 

供试品溶液制备方法制备供试品溶液,进样1O , 

记录细叶远志皂苷的谱峰面积值,计算细叶远志 

皂苷的含量,RSD为2.75%。 

2.8稳定性试验取同一个样品供试液,室温放置, 

在上述谱条件下于0,2,4,6,8,12,分别进样,记录细 

叶远志皂苷的谱峰面积值,RSD为1.45%。 

2.9空白干扰试验精取阴性对照液按上述谱 

条件测定,在细叶远志皂苷处无吸收峰,表明归脾丸 

和天王补心丸中的其他组分不干扰细叶远志皂苷的 

测定,见图1。 

2.10加样回收率精密称取已知含量天王补心丸 维普资讯

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August,2007 

细粉各2.0 g,共5份,分别精密加入细叶远志皂苷 

适量(加入量约为样品含量得100%)。按供试品溶 

为天王补心丸和归脾丸中不可或缺的一味中药。远 

志总皂苷是远志中的主要活性成分,因此选择远志 

总皂苷来控制这2种中成药的质量十分必要。细叶 

远志皂苷是远志总皂苷碱水解的产物,远志总皂苷 

液制备方法制备供试液,依法测定含量,计算回收 

率,结果平均回收率为97.5%,RSD为2.46%。 

2.11样品含量测定取各个批号的样品各3份, 

按供试品溶液制备方法处理,照上述谱条件测定。 

测定结果见表1。 

表1不同厂家2种中成药中细叶远志皂苷含量 

通过碱水解均能转化为细叶远志皂苷,作者通过碱 

水解处理样品,采用HPLC法测定两种含远志的中 

成药中细叶远志皂苷的含量,具有方法简便、准确、 

重现性好的优点,细叶远志皂苷可作为远志复方制 

剂中远志质量控制的指标。 

[参考文献] 

[1]中国药典[S].一部.2005:107,360,419. 

[2] 肖平.镇咳、平喘、祛痰中药的药理作用[J].中成药研究, 

1984,8:25. 

[3]彭汶铎,许实波.四种远志皂苷的镇咳和祛痰作用[J].中国 

药学杂志,1998,33(8):491. 

[4]Nikaido T,Ohmoto T,Saitoh H,et a1.Inhibition of cyclic adeno— 

sine monophosphate phosphodiestemse in Polygala tenuifolia[J]. 

Chem Pharm Bill,1982,30(6):2020. 

3讨论 

分别考察了甲醇.水、乙腈.水、甲醇-0.05%磷酸 

水和乙腈-0.05%磷酸水等4个溶剂系统,结果发现 

甲醇.().05%磷酸水作为流动相对照品分离度和峰 

形最好。同时考察过用ELSD作为检测器,结果其 

灵敏度很低,远不如UV 202 Illi1。在UV 202 Illi1,细 

叶远志皂苷的最低检出浓度为5.50 g·mL~,由 

此可以看出,其灵敏度较高。 

天王补心丸和归脾丸为常用中成药,但是其含 

[5]Dugan J J,Mayo P,Starratt A N.Polygalic acid[J].Tetrahed— 

rOB Letters,1964,5(37):2567. 

[6]Pelletier S W,Nakamura S,Soman R,et a1.Constituents ofloo— 

lygala species:the structure of tenuifolin,a prosapogenin from P. 

senega and P.tenuifolla[J].Tetrahedron,1971,27(19): 

4417. 

[7] 董晓兵,李军,董婷霞,等.远志皂苷标准品Tenuifolin的制 

备『J].中药新药与临床药理,2007,18(1):56. 

量测定方法未见报道。远志具有安神益智的作用, 

Determination of tenuifolin in Tianwang Buxinwan and Guipiwan by HPLC 

DONG Xiao—bing ._,LI Jun ,JIANG Yong3,ZHENG Ying ,DONG T.X.Tina ,TU Peng—fei ,TSIM W.K.Karl 

f 1.Institute ofChinese Medical Sciences ofMacau University,Macau,China; 

2.Centerfor Chiesne Medicie R&D nand Department ofBiology.The Hung Kong University 

fScioence and Technology,Hung Kong,China; 

3.Departentm ofNatural Medicies,Schooln ofPharmaceutcial Sciences,Peking University Health 

Sciecen center,Be ng 100083,Chia)n 

[Abstract]Objective:A quantitative method was developed for the determination of tenuifolin in Tianwang Buxinwan and Guipi— 

wan by HPLC.Method:The samples were separated by Alltima C18 column(4.6 mm x 250 mm,5 trm)using methanol一0.05% 

phosphoric acid(65:35)as a mobile phase,flow rate was 1.0 mL·min~and wavelength was set at 202 nm.Result:Tenuifolin Was 

detected in both Chinese preparations.The number of theoretical plates calculated by tenuifolin peak was 2 500.The regression equa— 

tion 0ftenuifolin was Y=5.239×10 X-6.247×10 (r =0.999 4)and the liner range Was 10—500 g·mL_。.The average recovery 

of tenuifolin Was 97.5%f RSD less than 3.0%).1’he LOD of tenuifolin was 5.50 g·mL_。.Condusion: I’he method is sensitive, 

rapid and accurate. 

[Key words]HPLC;Tinwaang Buxinwan;Guipiwan;Radix Polygalae,tenuifolin,quantitative determination 

[责任编辑鲍雷] 

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