血小板假性减少的原因
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摘要:目的:分析临床常见的血小板假性减少的原因,探讨针对不同的原因采取不同方法进行纠正处理。
方法:按照BeckmanCoulterACT5diff的分类原理及血小板(PLT)直方图,把PLT直方图异常且血小
板数值小于100×109的标本采用血涂片镜检、手工计数和枸橼酸抗凝复检。结果:不同原因的假性血小板
减少与复检结果有显著性差异。结论:血小板假性减少均应进行复检,以为临床提供准确可靠的数值。
关键词:血小板计数;血小板聚集;血细胞
血细胞几乎已经在每个大中小医院广泛使用,由于仪器自身检测原理的限制以及血小板易于黏附
聚集的特点,血小板检测经常出现假性减少,仪器往往提示PLT计数异常或PLT直方图异常,但有时提示
的是白细胞或红细胞异常。因此,必须综合分析血小板检测的影响因素,采取恰当的处理方法,回报临床
客观准确的数值。
1资料与方法
1.1一般资料:选取我院2010年3月~2011年8月住院患者48例,其中男20例,女28例,平均年龄
52岁。
1.2仪器:BeckmanCoulterACT5diff全自动血液;Olympus显微镜。
1.3试剂:上述血液的原装配套试剂;PLT草酸铵稀释液(参照《全国临床检验操作规程(第三版)》
配置);瑞姬染液。
1.4方法:首先所有标本按常规用EDTA-K2抗凝全血进行检测,PLT出现异常旗标且PLT<100×10标本,
进行涂片瑞氏染镜检,根据镜检结果和PLT直方图结果分为4组:①PLT直方图出现无拟合曲线、翘尾
等现象,镜下可见大量血小板凝块或小堆积,则要求临床重新采集标本,复检后正常,基本推测是采集原
因造成血小板假性减少;②PLT直方图和初步镜检结果同第一组,如果两次采集过程均顺利,EDTA抗凝结
果均不正常,标本中仍存在血小板聚集,则改用枸橼酸钠抗凝剂,结果正常则推断是EDTA抗凝剂原因造成,
若仍不正常,则推断此患者对EDTA和枸橼酸钠均发生聚集,目前只能用手工法校正(本文6例标本,仅对
9
[1]
EDTA依赖,枸橼酸钠依赖现象极少);③PLT直方图出现多峰、后峰翘起等,镜下血小板并未聚集,血小
板数量初步判断在正常范围内(每个油镜视野可见8~15个血小板),但是大血小板数量增多,体积接近
小红细胞,基本可断定是由大血小板干扰计数造成,此类标本进行手工计数;④镜检红细胞呈缗钱状排列,
血小板成或散在分布,数量正常,同时结合标本外观,试管内有许多沙粒样凝集颗粒,初检结果WBC、
RBC、HB、HCT、MCV、MCHC、PLT等许多检测项目均异常,尤其是RBC数值很低,可考虑是冷凝集原因造成,
标本经37℃水浴15min后,上述现象消失,重新检测结果正常。实际工作中有可能存在几种原因叠加的
情况,但据笔者经验此种现象很少(本文48例无此现象),检验人员应根据PLT直方图和镜检结果加以区
分,并最终采用手工法校正(48例标本均经手工法最终校正PLT数量)。
1.5统计学方法:采用SPSS17.0统计学软件分析,应用配对t检验进行统计学处理,以P<0.05为差异
有统计学意义。
2结果
所有标本初检结果均不正常,第一组经复检后(EDTA-K2抗凝)正常,第二组经两次复检,使用枸橼酸钠
抗凝剂后正常,第三组采用手工法后正常,第四组水浴后正常。所有标本初检结果与复检正常后和手工计
数法结果相比差异有统计学意义(P<0.05)。详见表1。
表1血细胞初检、复检和手工计数检测结果比较(
初检(EDTA-K2抗凝)
原因例数
(×10)9
)
手工法校
正(×10)9
复检后(EDTA-K2抗凝)复检后(枸橼酸抗
(×10)9凝)(×10)9
标本采
36
集
①①
67±32128±27①无需采用125±22①
抗凝剂658±2861±29148±34142±41
大血小
5
板
65±25无需采用无需采用114±22①
其他(包
括冷凝
集)
注:与初检(EDTA-K2抗凝)比较,①P<0.05;由于枸橼酸钠抗凝剂为液体抗凝剂,与血液比例为1:9,故
计数结果应乘以1.1为准确结果,本文结果为校正后结果
3讨论
3.1标本采集过程的影响:采血过程不顺利、多次穿刺、采血带绑扎时间过长等均可引起组织凝血因子混
入血液标本中产生肉眼看不见的小凝块而引起PLT假性减少;采血后混匀不及时、混匀不充分导致抗凝
不充分而引起PLT聚集。标本采集过程的影响在临床常见,尤其是老年人、婴幼儿。
3.2抗凝剂EDTA影响:EDTA依赖型导致血小板假性减少国内外均有多例报道,其原因与血小板表面存在
着隐匿性抗原有关,此抗原与血浆中自身抗体相结合,从而导致血小板与纤维蛋白原聚集成团。本文中6
例患者,5例为肿瘤患者,另1例为体检患者且均为女性,均因“易发瘀斑综合征”而前来就诊。此类标
本解决办法通常改用枸橼酸钠抗凝血检测或用手工计数法复核。
3.3大血小板影响:根据BeckmanCoulterACT5diff血细胞原理,当标本中存在大血小板时,血
小板分布峰右移,MPV(平均血小板体积)明显增高,一般大于12fl,而同时MCV和RDW(红细胞体积分
布宽度)正常,排除小红细胞影响。MPV阈值为2~18fl,当血小板体积大于25fl时,这些大血小板很
有可能被误认为小红细胞而不纳入血小板计数范围,致使仪器计数PLT偏低。大血小板和巨大血小板在正
常人中仅占1%和0.02%,增多时多提示该患者有血小板生成、成熟过程或功能性等改变。本文中5例多
为原发性血小板减少性紫癜、血小板无力症、急性心梗患者等。有血小板相关疾病的患者应注意大血小板
的影响。
[4]
[3]
[2]
145±4水浴后:110±12无需采用108±10①
3.4其他影响:血小板冷凝集、异常蛋白血症、储存时间过长、高镁血症、脂类与蛋白的聚集的影响等。
本文中的1例为冷凝集素引起,血清中高滴度的寒冷凝集素,能与患者自身红细胞在低温下产生冷凝现象,
它不但能凝集红细胞也能凝集血液中的有核细胞和血小板,导致血液检测结果异常[6-7]
[5]
。
血小板数量的检测是血常规中重要的项目之一,其值准确与否直接关系到临床诊断和治疗的工作,所以
及时发现假性血小板减少是检验人员必修的功课。重视异常结果,勤于镜检和复检,为临床提供准确可靠
的数据,可以减少很多医患纠纷,同时也加强了临床与检验之间的信任与依赖。
4参考文献
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[6]刘玲玲,王学军,闫洪宇.冷凝集致全血细胞检测误差2例报告[J].吉林医
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