酒泉地区婴幼儿腹泻轮状病毒感染及其型别的研究
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酒泉地区婴幼儿腹泻轮状病毒感染及其型别的研究
摘要目的:通过分子流行病学调查,研究酒泉地区婴幼儿轮状病毒(RV)腹
泻的分型特点。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和逆转录-聚合酶链反应
(RT-PCR),对2001年11月~2002年12月酒泉地区收集的324例婴幼儿腹泻粪
便标本中的204份进行轮状病毒病原检测,并对阳性标本进行分型。结果:ELISA
法RV阳性率为54.9%,阳性率与性别无关。不同年龄段的感染率以7~18个月
年龄段最高,但各年龄段间差异无显著性意义。不同月份的感染率差异具有显著
性意义,发病高峰在2001年11、12月份和2002年10、11月份。在ELISA阳
性标本中RT-PCR法检出G3者50例,G1者16例、G2者6例,G9者2例,
G3与G1混合感染6例,G3与G2混合感染2例,30例未能分型。G分型阳性
标本中检出P[8]型24例,P[4]型14例,未发现P[6]、P[9]、P[10]。结论:轮状
病毒是酒泉地区婴幼儿非细菌性腹泻的主要病原,其流行的主要血清型为G3型
及G1型。本次研究结果从分子水平初步揭示了酒泉地区轮状病毒的流行情况,
为轮状病毒疫苗在该地区的应用提供了流行病学资料。
关键词腹泻婴幼儿轮状病毒分子流行病学基因型
资料和方法
2001年11月~2002年12月共采集酒泉市人民医院儿科门诊和住院部婴幼
儿腹泻粪便标本324例,置-70℃保存备用。采用SPSS11.0软件随机抽样选取
204例标本进行检测。
用ELISA法检测RV抗原,采用IDEIATMRotavirus试剂盒,购自英国
DakoCytomationLtd,按说明书操作。
用RT-PCR法对RV病毒株进行血清株与基因型的鉴定,TaqDNA聚合酶和
AMV逆转录酶购自美国PromegaCorporation;RNA酶抑制剂(RNasin)购自宝生
物工程(大连)有限公司;TRIZOL购自MolecularResearchCenterInc.;dNTPs购
自sbs赛百盛公司;DNAMakerDL2,000购自宝生物工程(大连)有限公司。采用
PTC-100TMPCR仪(美国MJRESEARCH公司)进行PCR反应。用TRIZOL提取
RV核酸。先逆转录合成病毒cDNA,后巢式PCR对RV标本进行分型,方法见
文献[1]。
每批分别用已测序证实的粪便标本作为阳性和阴性对照。
统计学方法:采用SPSS11.0进行统计,计量资料用均数±标准差表示,两
组比较采用非配对t检验,计数资料采用X2检验。
结果
RV腹泻的年龄分布:本研究共采集酒泉市人民医院就诊婴幼儿腹泻粪便标
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