儿童肺炎支原体感染三种实验诊断方法评价
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儿童肺炎支原体感染三种实验诊断方法评价
目的:探讨儿童肺炎支原体感染的快速、简便、有效的临床实验室诊断方
法。方法:对2016年12月收集的200例临床呼吸道感染患儿的咽拭子和静脉血
样本进行肺炎支原体快速鉴定培养镜检、抗体检测、抗原检测及荧光定量PCR
(Polymerasechainreaction)分析。以快速培养鉴定镜检法为诊断肺炎支原体感
染金标准,比较抗体检测、抗原检测及荧光定量PCR三种诊断方法的灵敏度、
特异度和Youden指数(正确诊断指数)。结果:抗体檢测的灵敏度、特异度和
Youden指数分别为76.3%、77.9%、54.2%;抗原检测为37.7%、89.5%、27.2%;
荧光定量PCR为93.0%、96.5%、89.5%。荧光定量PCR法的灵敏度、特异度和
Youden指数均高于抗体检测和抗原检测法(P<0.05),三者Youden指数两两比
较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:荧光定量PCR具有较高的灵敏度、
特异度和Youden指数,可以在未来替代快速鉴定培养镜检、抗体检测和抗原检
测法,作为临床诊断儿童肺炎支原体感染的快速、简便而有效的实验室诊断方法。
肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae,MP)是一种大小介于细菌和病毒之
间,缺乏细胞壁,能利用人工培养基生长繁殖的原核细胞型微生物,是人类支原
体肺炎(niaepneumonia,MPP)的病原体。MP主要经飞沫传播,潜
伏期2~3周,易感人主要为儿童和青少年[1-3]。国内外多项研究表明,MP
的感染发病率从0.6%~47%不等,占儿童社区获得性肺炎(Community-acquired
pneumonia,CAP)病原体的70%左右。随着大环内酯类抗菌药物的广泛应用,
其耐药性有所增加,甚至出现了耐药株。有效而灵敏的实验室诊断方法是诊断
MP感染的主要依据。目前,国内大多医院对MP感染的诊断,依旧停留在典型
的临床感染症状结合血常规及MP抗体检测或MP培养进行诊断的水平。近年来,
荧光定量PCR(FluorescencdquantitativePCR,FQ-PCR)和抗原检测诊断MP
感染虽已在临床科研中少量使用,但大多医院并未广泛应用[4-6]。在国外,PCR
基因诊断已作为临床诊断的一种常用手段,以FQ-PCR为主。本研究采用MP快
速鉴定培养镜检、ELISA抗原检测、被动凝集抗体检测和FQ-PCR对2016年12
月收治的200例患儿进行MP检测,并以快速鉴定培养镜检为MP感染诊断的金
标准对抗体检测、抗原检测、FQ-PCR三种方法进行方法学评价,探讨适合MP
感染早期快速、简便而有效的诊断方法,现报道如下。
1材料与方法
1.1材料选取2016年12月就诊于厦门市海沧医院儿科的0~10岁未使用
抗菌药物治疗的CAP患儿,且在发病前三个月内无呼吸道感染症状或血常规及
胸片等相关检查不支持呼吸道感染。男100例,女100例,男∶女=1∶1,平均
年龄(4.87±1.21)岁。CAP诊断依据中华医学会呼吸病学分会2006年制定的诊
断和治疗指南标准。
1.2仪器和试剂(1)ABI7500Fast实时荧光定量PCR系统(美国ABI公
司);(2)KDC-2046台式低温离心机(中国科大创新公司);(3)超低温冰箱(日
本SANYO公司);(4)恒温培养箱(德国贺利氏公司);(5)酶标仪(美国BIO-RAD
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